1、色譜柱安裝與平衡
使用經(jīng)過(guò)濾并脫氣的流動(dòng)相(不含任何緩沖液)沖洗HPLC泵和管線,確保系統(tǒng)中沒(méi)有氣泡。按照流向標(biāo)簽(位于色譜柱上)指示的方向?qū)⑸V柱一端連接至進(jìn)樣器,另一端不接檢測(cè)器。將泵流速設(shè)置為0.1mL/min(或系統(tǒng)允許Z低設(shè)置)并在5分鐘內(nèi)增大至正常流速。當(dāng)色譜柱出口處有溶劑自由流出時(shí)停止泵送,擦拭出口端并將其連接到檢測(cè)器。以正常流速和約 10-30倍色譜柱體積的流動(dòng)相來(lái)平衡色譜柱。
2、檢測(cè)柱效
建議用戶在收到Kromasil色譜柱15天內(nèi)進(jìn)行柱效檢測(cè),并在整個(gè)使用周期內(nèi),進(jìn)行定期的柱效測(cè)試,以便隨時(shí)監(jiān)測(cè)色譜柱的壽命情況。
3、運(yùn)行參數(shù)
工作壓力上限=400Bar(~6000psi)。
工作溫度上限=60℃。
在使用Kromasil Classic系列C4、C8、C18、Phenyl色譜柱時(shí),建議將流動(dòng)相的pH值控制在1.5-9.5之間,這樣有利于延長(zhǎng)柱子的使用壽命。
4、流動(dòng)相的配置
僅使用HPLC色譜純?nèi)軇⑺?、高純度的化學(xué)品和試劑使用前要對(duì)所有流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾和脫氣確保溶劑可互溶。
5、貯存
色譜柱使用完畢后,應(yīng)盡可能地沖洗掉殘留在色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)和沉積物。保存在適合的儲(chǔ)存溶劑中,儲(chǔ)存溶劑可以參考COA中建議使用溶劑。儲(chǔ)存環(huán)境需保持溫度穩(wěn)定、避光,并注意檢查Peek堵頭,防止松動(dòng)導(dǎo)致柱內(nèi)溶劑流失。
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